수입 의약품 관리 및 신약개발

류항묵 대한보건협회 1995 대한보건연구 Vol.21 No.1

의약품개발과 임상연구

류항묵 한국임상약학회 1992 한국임상약학회지 Vol.2 No.1

제 3 회 신약개발 연구발표회 초록집 ( 1994 . 4 . 15 ~ 16 ) : 포스터발표 제 2 분과 ( 생명공학 , 약효검색 , 약리대사 ) ; Rat 의 실험적 건망 모델에 있어 항치매 효과 물질의 약효 검색에 관한 연구

이영근,류항묵,김옥희,양지선,이숙영,노응남,강석연 한국응용약물학회 1994 학술대회 Vol.1994 No.1

초록집 ( 1993 . 4 . 15 ) : 1993 년도 신약개발 연구결과 / 미발표 결과 목차 ; Rat 의 실험적 건망 모델에 있어 항치매 효과물질의 약효 검색에 관한 연구

이영근,류항묵,김옥희,양지선,이숙영,노용남,강석연 한국응용약물학회 1993 학술대회 Vol.1993 No.1

Culture of Rat Embryos During Early Organogenesis

Chin, Kang,Lee, You Mie,Rheu, Hang Mook 한국환경독성학회 1991 환경독성보건학회지 Vol.6 No.1

포유동물의 최기형성을 연구하는데 가장 많이 사용되는 동물인 설치류중 랫트의 배자를 이용하여, egg-cylinder기를 지나 head-fold가 이루어지는 초기체절기인 9.5일경부터 뇌, 눈, 귀, 심혈관계가 형성되는 시기인 11.5일까지 2일(48시간)동안, 체외에서 배양하였다. 그 배양의 최적조건은 실험실마다 다르기 때문에 최적조건확립을 목적으로 이 실험을 행하였다. 온도는 37℃?.2℃로 유지시키고 가스는 배양초기인 9.5일~10.5일 동안을 50% O₂, 5% CO₂, 90% N₂가스를 공급하여 10.5일부터 6시간 동안은 20% O₂,5% CO₂, 55% N₂가스를 배양계에 공급 했을 때 가장 좋은 결과가 나왔다. 배양배지로서는 랫트 IC혈청을 분리하여 열비동화시켜서 사용하였다. 이종혈청이나 합성배지를 첨가해서 배양할 경우는 랫트 혈청에 비해 성장이 좋지 않은 것으로 관찰되었다. 동물실험법의 대체법으로서 배자양법의 기본조건을 확립하여 최기형성 평가 방법으로서의 가능성을 제시하였다. Rat embryos were cultured out of the mother from the head-fold stages, 9.5 days to 11.5 days during which they start to develop the brain, eyes, ears and cardiovascular system etc. We principally did the basic experiment in order to establish the best condition of the rat whole embryo culture in our laboratory. The temperature in the culture system was maintained 37℃ ±0.2℃ for 48 hrs. The culture was carried out in humidified atmosphere of the air, intially, the bottles were equilibrated with 5% O₂, 5% CO₂, and 90% N₂ gas mixture. After 22 or 24 and 29 or 30 hrs the cultures were reequilibrated with 20% O₂, 5% C0₂, 75% N₂ and 40% 0₂, 5% CO₂, 55% N₂ respectively. Various types of sera were tested and for the purpose of minimizing the quantity of rat serum, artificial medium was also tried and it was determined that rat serum supported normal growth over a period of 48 hrs, based on total growth analysis and structural comparisons with in vivo specimens.

천연물의 항염증작용 검색에 관한 연구

이숙영,정수연,승상애,류항묵,이은방,양지선,유태무 식품의약품안전청 1997 식품의약품안전청 연보 Vol.1 No.-

본 연구에서는 여러가지 in vivo 동물모델을 이용한 항염증제의 효력 검색법을 확립하여 항암증제의 효력시험 수탁고시에 따른 시험법을 확립하고, 비교적 부작용이 적은 천연물을 대상으로 항염증작용 검색 및 ㅡㄱ 기전을 연구하고자 하였다. 대표적인 급성 염증 모델인 rat에서의 carrageenan 및 PAF 유도 족척부종법, 염증반응 1기의 대표적인 현상인 백혈구 유주도를 측정하는 모질인 meuse에서의 zymosan운토 백혈구 유주 억제도 측정법, 염증만응 3기의 섬유화 현상을 측정하는 모델인 rat에서의 cotton pellet유도 육아종 형성 측정법, 만성 염즈으이 대표적 모델인 ratd에서의 adjubant 유도 관절염법 등 6종으 in vivo호력 시험법을 표준화하고 당귀와 원방풍 물 , 추출액, 은행엽메탕올 추출액, 죽염 수영액의 항염증작용을 검색하엿다. 당귀 물 추출액(1g/kg), 은행엽 메탄올 추출액 (1g/kg),죽염(1.5g/kg)은 carrageenan 및 PAF 유도 부종을 유의하게 억제하였고, 이중 은해엽 메틴올 추출액은 모세혈관 투과도를, 죽염은 육아종 형성을 유의하게 억제하였다. 검색한 천연물 중 zyinosan 유도 백혈굴 육주 및 adjuva띠:유도 관절염에 대해 항염증 작용을 갖는 물질은 얼었다. Carrageenan 유도 족척부종에 대한 항염증 작용 중은행13탄을 추출액과 죽염은 초기 및 후기 부종 전시간대(0.511r~6hr)에 걸쳐 항투종 작용이 있었으나 당귀 물 추출액은 carrageenan 유』A 부종 쵸기(1시간 이내)와 PAF 유도 부종에 대해 항루종 작용이 있어 carrageenan유도 분종의 초기 단계는 매개물질로 PAF가 관련한다는 점을 고려한다면 당귀의 항염증작용은 염증 매개 물질인 PAf의 작용을 억제하여 나'타날 가능성이 있을 것으로 사료된다. 이상의 실험을 통하여 염증반응 각 단계에 대한 항염증작용 겋색법을 화립하여 항염증제의 효력시험 수탁 고시에 따른 시혐법을 표준화하였고, 비교적 부작용이 적은 수종 천연물을 대상으로 항영킁제로의 이용 가능성롸 그 기전을 연구하였다. These studies frere coadocted to standardize the screenin.g raethods o( antiinflammatorf , agents and to investigate antilnflamraatory effects and mechanism of .sction of natural products. Thmethods of "carrageenan induced foot edema", "PAF (platelet activating (actor) induced foot edema","inhibition test of vascular perra☞ability", "inhibition test of white blood cell migration", "formation egranuloraa" and "adjuvant indLiced arthritis" were estabilished. The antiinflammatory effects of fngeff-ca gigat fedeDoHriefBa sefefoifer, eiHfgo fifaD3 and Bamboo salt (Jukyom ) were investigated by in ri:same administration of methanolic extract of Ginkgo folium also inhibited the vascular permeability in - mice. The aqueous solution of Bamboo salt inhibited the formation of granuloma in SD rat at a oral dose -of Igfg. ABgelica gigantis rad;ix seems to have antiinflammatory effect by inhibition of PAF.

인삼의 항마약 효과 ( Antinarcotic Effect of Panax ginseng )

김학성,오기완,이명구,백동윤,류항묵,성연희 고려인삼학회 1990 Journal of Ginseng Research Vol.14 No.2

인삼 사포닌의 전처치 부위에 따른 Morphine 진통력 길항작용 ( Antagonism of Morphine Analgesia by the Pretreatment Sites with Ginseng Total Saponin )

김학성,오기완,오세관,류항묵,성연희 고려인삼학회 1991 Journal of Ginseng Research Vol.15 No.1

초록집 ( 1993 . 4 . 15 ) : 제 1 분과 ( 합성 , 천연물 ) ; 신규 항암제 DA-125 의 물질연구 및 약리연구

양중익,김원배,김기성,류항묵 한국응용약물학회 1993 학술대회 Vol.1993 No.1

천연물이 간대사에 미치는 영향에 관한 연구(Ⅲ)

김순선,최기환,김학림,황인창,김동섭,신윤용,류항묵,장영섭 식품의약품안전청 1998 식품의약품안전청 연보 Vol.2 No.-

본 연구에서는 만성간염둥 간낄환 01방 및 치료제로서 오래전부터 널러 사용죄고 있으나 그 작용기전이 화실히 밝궈져있지 않은오미자에서 추출한 을hisandrin C의 합성 동족체, biphenf·1 dimethrt carboxylate(ODB)의 간장 보호자용 기전 연구의 일환으로 DDB를 시간(I~T일) 및 용량(25, 50, 100, 200mg/kg)별로 랫드에 투여한 훌 간장내 약물대사효소, CYPtAl과 CYPEBI mRNA 합량을 PolyrEerasff chain reation(PCR)밟법으로 측정하고 CfPIAl에 특이한 ethoxyruesorfin-o-deethylase(EROD)와 CYPaBt에 특이한 benzyloxyresorufin-o- dealkrlase(BROD) 활성을 측정한 결꽈, DDB가 CYPIAI mRNA 힘·량 및 EROD활성에는 영향을 미치지 않았으나 CYPfBl 유전자 발현을 유도시키고 CYPEBI에 특이한 fiROD 될성을 증가시켰다. DD8의 이러한 CYPEBI 유전자 발현유도 효과는 투여시간, 용량에 비례하여 3일, 200rag/kg투여시에 극대치를 나타내었으며 BROD찰상 역시 투여시간, 용량에 비례하여 증가하였다. 또한 DDB의 간보호 효과를 평가하기 위해 DDB를 용량(25, 50, 100,200mgJkg)별로 4일간 연속 길구투여하고 DDB 최종투여 3시간후 CCI,(0.3mJ/kg, i.p)를 처치하여 간독성을 유발 시킨 후, CYPfBl mRNA 함량과 BROD 활성을 조사하고 간조직 검사를 실시하였으며 혈청내 aminotransferase 꽉성 및 간소포체내 lipid perflxidation을 측정하였다. DOB 전투여는 CCI, 처치에 의왜 감소된 CYPBBI mRNA 함량자 BHOD 활성을 용량의콘적으로 증가시켰으며 CCI, 처치에 의해 증가된 혈청내 ALT 활성과 간 소포체 막의 lipid peroxidation을 감소시켰다. 혈청내 ALT 활성같 간 소포체 막치 lipid peroxidation에 근거하면 DDB는 CCI, 처치로 유발된 간독성에 럴호효롸를 나타내며 그 효과는 50mg/kg;투여시에 최대인 것으로 보인다. 반면, CCI, 처치에 의해 유발된 간 표면의 섬유화, 간세포 괴사 및 공포화 변성은 DDB 투여에 의해 통계적으로 유의성있는 개선 효과를보이지 않았다. 이상의 결과는 DDB가 CYP2린1 유전자 발현 및 BROD 활성을 시간 및 용량의존적으로 증가시킴을 나타내며 DDB의 free radical scavenger가능성을 제시한다. 미와 더불어 전년도 시험물질, 대황 및 마황의 환셩성분인 rhein, eptledrine과 황금의 지표성분인 baicalin이 간 대사 및 독성에 미치는 영향을 비교평가 하기 위해 rhein 및 ephedrinr·을 각각 20, 10mg/kg 용량으로 랫드에 4일간 복강주사하고 baicalin은 4mg/kg 용량으로 7일간 경구투여한 후, 간장내 약물대사 효소 CYPIAI과 CYPaBl 유전자 발현정도를 조사하고 애들에 특이한 EROD 와 BROD활성, 혈청내 ALT, AST 활성 및 간소포체내 지질과 산화물(rnslondialdehyde) 함량을 측정한 결과, ephedrine은 만성간염지표인 ALT/AS? ratio을 증가시키고(p (0.03) rhein은 MDA함량을 증가시켰는데,(p(0.01) 이는 대황 투여에 의한 간 소포체 막의 lipid peroxidation증가는 rhein에,마황에 의한 혈청내 ALT/AST ratio증가는 ephedrine에 기인함을 시사해주는 결과이며 금의 지표성분인 baicalin투여에 의해서는 혈청중 ALT 및 AST 활성이 재조군에 비해 유의적으로 감소되어(p(0.05) baiealin의 간보호 가능성을 제시하였다. Biphenyl diinethyl dicarboxylate(DDB) is a synthetic analogue of SchiBandrin C isolated from SchiBandrae Fructus and has been widely used for its hepatic protective effect. This study has beenundertaken to examine the effect of DDB on rat liver drug metaboliEing enzymes and to understand theprotective mechanism of D:DB against carbon tetrachloride(CCl4) -induced hepatic toxicity in rat liver.After DDB was administered into male rats for different periods of time(1 ~7 days) ana with differentdoses(25, 50, 100 and 200mg/kg), mRNA levels of CYPIAI and CYPaHl were measured by polymerasechain reaction (PCR) and also assayed the activities of CYP IAI specific ethoxyresorufin-o-deethylase(EROD) and CYPfBl sf)ecific benzyloxyresorufin-o-dealkylase (BROD) . Furthermore, rats werepretreated with DDB 25, 5() and 100 mg/ltg daily for 4 days, 3-hours after final treatrneBt on the 4thday, CCI, 0.3mf/kg was intraperitonially injected into the rats. Activities of serum aminotransferaseswere assayed and determirled lipid peroxidation(production of ualondialdehyde) in hepatic microsomeand done histopathological examination. DDB treatment resulted in increase in CYPaBl mRMA leveland BROD activity whereas there was no change in CYPIAI niRNA level and EROD activity. This ef-fect of DDB was time and dose dependent reaching maximal level by 3 day and 200mg/kg treatment.Based oi?'studies of serum ALT level and lipid peroxidation, D:DB SOmg/kg pretreatinent appeared themost effective protection against CCI,-induce4 hepatotoxicity. :However, histopathological examinationdid not significantly show any improving effect on balloning degeneration and necrosis caused by CCI,treatment. These results in.dicate that DDB stimulates CYPEBI ruRNA level and BROD activity in timeand dose dependent manner and suggest protective effect of DDB against CCI,-induced hepatotoxicitymight be exerted through free radical scavenging. In addition, we have also investigated the effects ofrhein, ephedrine and baicaBin on hepatic toxicity and metabolism in rat liver in order to compare withtheir natural products f·hick are Rhei Rhizoma, Ephedrae Hel·ba and Scutellariae Radix, respectively.After rhein 20 and ephedrine 10mg/kg were intraperitonially injected into the rats daily for 4 daysrespectively compared as bacaBin was treated orally for 7 days, the expression of CYPIAI and CYPfBlwere examined and tlleir dependent EROD and BROD activities were assayed. The levels of serumaainotransferases and hepatic rnaiondialdehyde(MDA ) were Beasured as well. Ephedrine treatment in-creased in CYPIAI specific EROD activity and the ratio of serum ALT/AST ratio, a marker of chronichepatitis(p <0.01). MDA level was enhanced by rhein treatmentfp < 0.01), but baicalin reduced serumALT and AST levels compared to control group (p < 0.05) .