Effects of epigallocatechin gallate on CoCl_(2)-induced apoptosis in PC12 cells

Yang, Kyu-Ho,Mo, Hyun-Chul,Choi, Nam-Ki,Kim, Seon-Mi,Kim,Won-Jae 大韓小兒齒科學會 2006 大韓小兒齒科學會誌 Vol.33 No.1

Neuronal apoptotic events, consequently resulting in neuronal cell death, are occurred in hypoxic/ischemic condition. This cell death has been shown to be accompanied with the production of reactive oxygen species (ROS), which can attack cellular components such as nucleic acids, proteins and phospholipid. However, the underlying mechanisms of apoptosis induced in hypoxic/ischemic condition and its treatment methods are unsettled. Cobalt chloride (CoCl_(2)) has been known to mimic hypoxic condition including the production of ROS. Epigallocatechin gallate (EGCG). a green tea polyphenol, has diverse pharmacologial activities in cell growth and death. This study was aimed to investigate the apoptotic mechanism by CoCl_(2) and effects of EGCG on CoCl_(2)-induced apoptosis in PC12 cells. Administration of CoCl_(2) decreased cell survival in dose- and time-dependent manners and induced genomic DNA fragmentation. Treatment with 100 µM EGCG for 30 min before PC12 cells were exposed to 150 µM CoCl_(2), being resulted in the cell viability and DNA fragmentation being rescued. CoCl_(2) caused morphologic changes such as cell swelling and condensed nuclei, whereas EGCG attenuated morphologic changes by CoCl_(2). EGCG suppressed the apoptotic peak and a loss of Δψ_(m) induced by CoCl_(2). CoCl_(2) decreased Bcl-2 expression but Bax expression was not changed in CoCl_(2)-treated cells. EGCG attenuated the Bcl-2 underexpression by CoCl_(2). CoCl_(2) augumented the cytochrome c release from mitochondria into cytoplasm and increased caspase-8, -9 and caspase-3 activity, a marker of the apoptotic executing stage. EGCG ameliorated the incruement in caspase-8, -9 and -3 activity, and cytochrome c release by CoCl_(2). NAC (N-acetyl-cysteine), a scavenger of ROS, attenuated CoCl_(2)-induced apoptosis in consistent with those of EGCG. These results suggest, that CoCl_(2) induces apoptotic cell death through both mitochondria- and death receptor-dependent pathway and EGCG has neuroprotective effects against CoCl_(2)-induced apoptosis in PC12 cells. 신경세포자멸사는 저산소 및 허혈환경에서 일어나며 이러한 세포죽은 reactive oxidant species (ROS) 생성을 동반함이 알려져있다. 그러나, 저산소 및 허혈환경에서 일어나는 세포자멸사의 기전 및 그 치료방법은 아직 정립되어 있지 않다. CoCl_(2)는 ROS를 생성하는 등 저산소환경과 유사한 조건을 초래하는 것으로 알려져 있다. Epigallocatechin gallate (EGCG)는 녹차의 polyphenol 성분으로서 세포성장과 죽음에 다양한 약리학적 효과를 나타냄이 알려져 있다. 본 연구는 PC12 세포에서 CoCl_(2)에 의한 세포자멸사기전을 밝히고 이에 미치는 EGCG의 효과를 조사하는데 목적이 있다. Cell viability는 MTT 측정으로 조사되었고, DNA fragmentation은 DNA laddering으로 조사되었다. Bcl-2와 Bax발현 정도는 RT-PCR로, caspase-3와 -9의 활성은 spectrophotometer, caspase-8의 활성은 flow cytometry에 의해 측정되었다. 미토콘드리아에서 세포질로 분비된 cytochrome c는 western blot으로, 분해된 DNA 양과 미토콘드리아 세포막전위 (Δψ_(m))는 FACScan으로 조사되었다. CoCl_(2)투여로 PC12 세포수는 용량 및 시간 의존형태로 감소하였고, genomic DNA fragmentation이 발생하였다. CoCl_(2)투여로 야기된 cell viability의 감소와 DNA fragmentation은 EGCG 전처치에 의해 억제되었다. CoCl_(2)은 세포용적팽창과 condensed nuclei 같은 형태적 변화를 일으켰으며, apoptotic peak, Δψ_(m)감소 및 cytochrome c 유리를 야기하였다. EGCG는 CoCl_(2)에 의한 세포형태변화, apoptotic peak, Δψ_(m)소실 및 cytochrome c 유리를 억제시켰다. CoCl_(2)는 Bcl-2 발현을 감소시켰지만, Bax 발현에는 영향을 미치지 않았다. EGCG는 CoCl_(2)에 의해 야기된 Bcl-2 발현 감소를 억제시켰다. CoCl_(2)는 caspase-3, -8, 그리고 -9의 활성을 증가시켰으며, EGCG는 CoCl_(2)에 의한 세포자멸사를 억제시켰다. 본 실험결과는 PC12 세포에서 CoCl_(2)가 미토콘드리아 의존 및 death receptor의존 기전으로 세포자멸사를 일으키며, EGCG는 세포자멸사기전을 억세지킴으로 신경보호기능을 가짐을 시사하였다.

8년간(1992~1999) 산업안전보건연구원에 의뢰된 직업병 심의 사례 분석

강성규,김규상,김양호,최정근,안연순,진영우,최병순,양정선,김은아,채창호,최용휴,김대성,박정선,정호근 대한산업의학회 2000 대한직업환경의학회지 Vol.12 No.2

Objectives : Pneumoconisis and noise-induced hearing loss (NIHL) have been reported as main occupational diseases by the Special Health Examination. The Industrial Accident Compensation Insurance has reported various work-related diseases, however, these two diseases occupied almost a half of compensated cases. Therefore, it was not well known about the status of occupational diseases other than pneumoconiosis, NIHL, and cardio-cerebrovascular accident (CVA). This study was conducted to analyze claimed cases as an occupational disease, that was requested to the Korea Industrial Safety and Health Agency (KOSHA). Methods : The local office of the Korea Labor Welfare Corporation (KLWC) has asked the KOSHA for confirmation of claimed cases as an occupational disease. We analyzed 379 cases requested from KLWC, the Ministry of Labor, employers, unions and occupational health agencies from 1992 to 1999. Results : Male was 80.7 % of the requested cases. Their mean age was 42 years old and 75.5 % of them were more than 35 years old. The requested cases were increased rapidly from 25 cases in 1992 to 108 cases in 1999 and the accept rate was 50.7 %. The majority of requested cases were respiratory diseases(22.4%), cancers(18.5%), Neuropsychiatric problems(14.5%), and musculoskeletal problems(13.5%). The accept rate was high in reproductive, respiratory, musculoskeletal and digestive disorders and low in neuropsychiatric, renal and otologic problems and occupational cancers. 73.6% of them were caused by chemical agents, especially 28.5 % were by organic solvents. 67% of them were clinically confirmed at university hospitals. A half of the cases were from KyongIn area, even the request came from the whole country. Conclusions : A claim was common in workers whose age was over 35 years old and exposure history was over 10 years. The respiratory diseases and neuropsychiatric disorders were still main problems in occupational health and occupational cancers was increasing even though its accept rate was not high yet.

정상인과 정신지체인의 치아우식증과 치아우식 원인균, 타액내 면역항체의 비교

최세원,양규호,최남기,강미선,임회순,오종석,김선미 대한소아치과학회 2007 大韓小兒齒科學會誌 Vol.34 No.3

수종의 밴드 접착 시멘트의 물성에 대한 비교 연구

양규호,김기백,김선미,최남기 大韓小兒齒科學會 2009 大韓小兒齒科學會誌 Vol.36 No.3

본 연구의 목적은 시중에 유통되고 있는 밴드 시멘트들을 종류별로 이용하여 교정용 밴드의 결합강도를 비교하고, 각 시멘트의 파절 양상을 비교하여 교정용 밴드에 대한 사용지침을 마련하는데 도움이 되고자 하였다. 100개의 발거된 인간의 제 3대구치를 이용해 실험군은 총 5개의 군으로 하였으며, 각 군당 시편수가 20개가 되도록 임의적으로 분류하였다. 실험에 사용한 밴드 시멘트는 다음과 같다; Ormco gold, Ultra Band-Lo™, Fuji Ortho™ LC, 3M Unitek™ Multi-Cure Glass Ionomer, Ketac-Cem™. Universal testing machine(Instron Corp., Canton, MA, USA)를 사용하여 최대하중값을 측정하였고, 전단결합강도 값을 계산하였다. 밴드가 탈락한 후, 탈락부위를 평가하여 법랑질과 시멘트, 시멘트와 밴드 사이로 구분하였다. 밴드의 전단강도는 One-way ANOVA를 이용하여 통계처리 하였으며 Tukey test를 이용하여 검정하였다. 또한 탈락 부위는 Chi-squre analysis를 이용하여 통계 처리하였고, Fisher's exact test로 군간 유의성을 검정하였다. 실험 결과 평균 파절 강도는 Ormco군이 가장 높았고(2.44±0.57), Fuji Ortho™군(2.24±0.50), Ketac-Cem™군(2.10±0.57), 3M Unitek™군(1.82±0.43), Band-Lok™군(1.73±0.28) 순이었으며, Ormco군은 Band-Lok™군과 3M Unitek™군, Fuji Ortho™군은 Band Lok™군과만 통계적으로 유의할만한 차이를 보였다(p<0.05). 파절 양상에서 Ormco군과 Band-Lok™군은 서로뿐만 아니라 다른 군과 유의할만한 차이를 보였으며, Fuji Ortho™, 3M Unitek™, Ketac-Cem™군 간에는 유의한 차이가 없었다. The aim of this study was to compare the shear-peel strength and the fracture site of 5 commercially available orthodontic band cements. One hundred molar bands were cemented to extracted human 3rd molars. The specimens were prepared in accordance with the manufacturer's instructions for each cement. After storage in a humidor at 37℃ for 24 hours. the shear debonding force was assessed for each specimen using an universal testing machine with crosshead speed of 2 mm/minute. Maximal failure stress was converted to mean shear-peel strength. MPa. The predominant site of band failure was recorded visually for all specimens as either at the band/cement or cement/enamel interface. Mean shear-peel strength of Ormco was the highest(2.44±0.57). followed by Fuji Ortho™(2.24±0.50), Ketac-Cem™(2.10±0.57). 3M Unitek™(1.82±0.43). Band-Lok™(1.73±0.28). There were statistically significant differences between Ormco and Band-Lok™. Ormco and 3M Unitek™. and Fuji Ortho™ and Band-Lok™(p<0.05). The predominant site of bonding failure for bands cemented with the Ormco was at the band/cement interface. whereas bands cemented with Ultra Band-Lok™ failed predominantly at the enamel/cement interface. There was no significant difference among the other cements(Fuji Ortho™. 3M Unitek™. Ketac-Cem™).

유전자(DNA)분석에 의한 삼풍백화점 붕괴희생자의 가족관계 확인 사례

최상규,한면수,선문숙,이양한,박기원 內務部 國立科學搜査硏究所 1996 國立 科學 搜査 硏究所 年報 Vol.28 No.-

복합레진 표면에 대한 APF gel의 영향

최남기,육근영,양규호,김선미 大韓小兒齒科學會 2006 大韓小兒齒科學會誌 Vol.33 No.1

소아의 치아우식증을 예방하기 위한 불소의 국소도포는 소아치과 영역에서 널리 시행되고 있다. 하지만 이러한 잇점에도 불구하고 최근 수복물 표면을 거칠게 한다는 부작용에 대해 논란이 되고 있다. 이에 본 연구에서는 불소도포가 심미 수복물의 표면변화에 미치는 영향을 평가하기 위해 수종의 복합레진에 국소도포용 불소젤을 도포시킨 후 변화를 관찰하였다. 시판용 레진인 Z 250(3M ESPE, USA), Ultraseal XT^(®)(Ultradent, USA), Filtek flow^(®)(3M, USA) , Revolution^(®)(Kerr, USA), Denfil^(®)(Vericom,Korea)를 이용하여 시편을 제작하고, 불소젤은 Topex^(®)(Sultan Dental Products,Canada)을 각각 1분과 4분동안 도포시켰다. 각 제품마다 불소젤을 도포하지 않은 5개의 시편을 대조군으로 사용하였다. 그 후 이 시편들의 표면 거칠기(Ra value,㎛)와 무게 차이를 측정하고 주사전자현미경을 이용하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 불소젤을 도포시키지 않은 대조군에서 가장 평활한 표면을 보였으며 1분군, 4분군 순으로 표면 거칠기가 증가하였다. 그리고 Revolution을 제외한 모든 제품에서 유의한 차이를 보였다(p<0.05). 2. 국소도포용 불소젤을 도포한 각 레진 시편의 무게 차이를 비교한 결과 대조군, 1분군, 4분군 간에 유의한 차이는 없었다(p>0.05). 3. 주사전자현미경 관찰시 불소젤에 도포시킨 실험군은 대조군에 비해 거친 표면을 나타냈다. 이상의 결과로 국소적 불소도포는 복합레진의 표면 거칠기에 영향을 미치며 이를 고려하여 사용한다면 4분보다는 1분간의 불소도포법을 이용하는 것을 추천할 수 있을 것으로 사료된다. Topical fluoride application for children is a widely performed procedure in the field of pediatric dentistry to prevent dental caries. However, it is recently recognized as having some unwanted effects on several esthetic restorative materials as it roughens the surface of the restorative materials. The aim of this study was to evaluate the surface changes in composite resins to topical fluoride. Composite resins(Z 250^(®),Ultraseal XT^(®),Filtek flow^(®),Revolution^(®),Denfil^(®))in topical fluoride agents were immersed and their surface roughness, weight loss and SEM were evaluated. The results were as follows: 1. The 4 minutes-immersion groups showed more roughened surface than 1 minute-immersion groups and the control groups showed the smoothest surface among all the materials, and there was statistically significant difference except the revolution between the groups. 2. There was no significant difference between the 1 minute-immersion groups and 4 minutes-immersion groups in weight loss. 3. The experimental group treated with topical fluoride gel showed the generally mere roughened surface than control group in the SEM findings.

전남대학교병원 소아치과에 내원한 부정교합 환자의 관한 연구

최남기,양규호 大韓小兒齒科學會 2000 大韓小兒齒科學會誌 Vol.27 No.1

최근의 사회경제적인 성장과 일반인의 치열 및 안모의 심미성에 대한 인식변화로 인하여 교정치료에 대한 관심이 날로 증가되고 있고 이에 따른 교정환자수도 증가하고 있다. 따라서 정확한 진단과 치료계획을 세우기 위해 부정교합에 대한 정확한 분류와 역학적인 연구가 필요성을 느끼고 전남대학교 병원 소아치과에 교정치료를 위하여 1986년부터 1999년 10월까지 14년간 전남대학교 병원 소아치과에 내원한 1,391명(남자658명, 여자723명)의 환자를 대상으로 진단 및 석고모형을 Angle씨 분류법과 유치열기 분류법으로 나누어 부정교합의 양상 및 성별, 연령별 분포 등을 조사하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 전체적으로 매년 교정환자수가 불규칙한 증감추세를 보였으며 여자환자가 남자환자보다 약간 더 많았다. 2. 내원한 환자를 연령군별로 조사한 결과 5세 이하군이 8.4%, 6-7세군이 29.6% 8-9세군이 34.3%, 10-11세군이 21.2%, 12-13세군이 5.7%, 14세군 이상군이 0.8%였다. 3. 유치열기에 해당하는 환자는 전체 환자 중 15.7%였고, 그중 mesial step이 83%, ddistal step이 4.6%, flush terminal plane이 12.4%였으며 mesial step중 82%가 전치부반대교합을 동시에 가지고 있었다. 4. Angle씨 부정교합분류법에 해당하는 환자는 전체 환자 중 84.3%를 차지하였고 그 중 Ⅰ급 부정교합이 34.7%, Ⅱ급 1류가 34.6%, Ⅱ급 2류가 2.1% Ⅲ급 부정교합이 28.6%였다. This study was aimed to provide an epidemiologic study so that we could accommadate their orthodontic needs adequately and to obtain the reliable quantitative information regarding the characteristics of orthodontic patients who visited the Department of pediatric dentistry. Chonnam National University Hospital from 1986 to 1999, october. The results were as follows. 1. The total number of orthodontic patients were 1,381(male 658. female 723) and the number of annual patients showed irregular trend and the number of male were slightly higher than that of female. 2. According to the investigation made by age group, the group of under 5 years, 6 to 7, 8 to9, 10 to 11, 12 to 13, and above 14 years showed 8.4%, 29.6%, 34.3%, 21.2%, 5.7% and 0.8%, respectively. 3. The patients corresponding to prima교 dentition were 15.7% of total patients and mesial step, distal step and flush terminal plane were 83%, 4.6% and 12.4% respectively. By the way 82% of mesial step had anterior crossbite at the same time. 4. The patients corresponding to Angle classification were 84.3% of total patients and Class I malocclusion, Class Ⅱ div. 1, Class Ⅱ div.2 and Class Ⅲ was 34.7%, 34.6%, 2.1% and 28.6%, respectively.

전신성 백색증(Oculocutaneous albinism) 환아의 증례 보고

최지은,최남기,김선미,양규호 大韓小兒齒科學會 2008 大韓小兒齒科學會誌 Vol.35 No.4

백색증(albinism)이란 신체 내 melanin 합성의 부분적,혹은 완전한 결핍에 의해 일어나는 질환이다. Melanin은 신체 내에서 머리카락,눈,피부 등에 분포하기 때문에 백색증 환자는 밝은 금발이나 갈색의 머리카락과 하얀 피부,붉거나 갈색의 홍채를 갖는 특징적인 외모를 지닌다. 백색증 환자는 변이된 유전자 및 임상적 특징에 따라 크게 전신성 백색증,안성 백색증,부분적 백색증으로 나뉘며 그 밖에 많은 하위군이 존재하고 그에 따른 치료법이나 치과적 주의사항도 달라진다. 본 증례는치아의 발육지연 여부평가를 주소로 내원한정신 지체가 동반된 전신성 백색증 환아로서 치아발거 등의 관혈적 시술및 보존수복,공간유지장치 등의 치료를 통해 양호한 결과를 보였기에 이를 보고하는 바이다. Albinism is a disease caused by partial or complete failure of melanin production in the skin,hair and eyes despite the presence of normal number,structure and distribution of melanocytes. Typical aspects are white-colored skin,blonde-brown hair,blue-brown irides and a prominent red reflex. Three main categories of albinism are oculocutaneous,ocular and localized albinism,and also they are divided into many subgroups. Therefore, appropriate treatment plan and dental direction would be differentiated according to them. This case report was about oral conditions and treatment of the oculocutaneous albinism patient with mental retardation who was refered due to developmental delay of teeth and treated with teeth extraction,restoration and space maintenance etc.

차세대 레진개발을 위한 광중합형 복합레진의 마모와 화학적 분해

양규호,최남기,육근영 大韓小兒齒科學會 2004 大韓小兒齒科學會誌 Vol.31 No.4

복합레진은 치질과 우수한 결합력을 가지며 심미적인 이유로 치과의 대표적 수복재로 자리잡고 있다. 그러나 저작력에 따른 마모와 구강내 환경에서의 수분흡수에 따른 가수분해가 복합레진의 강도약화를 야기하고 있다. 실험에 사용된 복합레진은 현재 임상에서 많이 사용되고 있는 Point4, Tetric flow, Heliomolar flow, FiItek supreme 이다. 각 제품의 화학적 분해와 마모도를 평가하기 위해 각각 10개의 시편을 제작하여 그 중 5개는 37℃의 수중하에 1Kg의 하중을 가하여 10,000 cycle동안의 마모도를 측정하였다. 나머지 5개 시편은 무게 측정을 한 후, 0.1N NaOH 용액, 3ml에 저장하여 60℃에서 보관한 후 2주 후 제거하여 1.23% HCI로 2시간 동안 중화하고 증류수로 세척한 후 60℃에서 건조하였다. 무게 손실, 분해층 깊이 및 시편내의 Si의 농도 변화, 최대 마모 깊이를 근거로 평가하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 각 제품의 무게 손실량은 Heliomolar flow, Filtek supreme, Point4, Tetric flow 순이었으며 Heliomolar flow, Filtek supreme을 제외한 다른 제품간에는 유의한 차이를 보였다(P<0.05). 2. 각 제품의 표면하 분해층 깊이는 Filtek supreme, Heliomolar flow, Tetric flow, Point4 순이었으며 Heliomolar flow, Tetric flow을 제외한 다른 제품간에는 유의한 차이를 보였다(P<0.05). 3. 각 제품으로부터 용출된 Si은 Filtek supreme, Heliomolar flow, Point4, Tetric flow 순이었으며 Point4, Tetric flow을 제외한 다른 제품간에는 유의한 차이를 보였다(P<0.05). 4. 최대마모깊이 측정시 Heliomolar flow, Point4, Filtek supreme, Tetric flow 순이며 0.1 N NaOH 용액에 보관한 레진의 마모깊이가 물에 보관한 레진에 비해 증가한 양상을 보였다. 5. 주사전자현미경 관찰시 NaOH 용액에 보관한 후 레진 기질과 충전제 사이의 결합의 파괴를 관찰 수 있었으며, 공촛점 레이저 현미경 관찰시 NaOH 용액에 보관한 후 수복재의 기질과 충전제 사이의 파괴양상인 분해층 깊이를 관찰할 수 있었다. The aim of this study was to evaluate the resistance to degradation and to compare the wear resistance characteristics of four composite resins in an alkaline solution. The resistance to degradation was evaluated on the basis of mass loss(%), degradation depth(㎛). Si loss(ppm) and wear depth. The brands studied were Heliomolar flow, Filtek supreme. Point4, Tetric flow. The results were as follows: 1. The sequence of the mass loss was in descending order by Heliomolar flow, Filtek supreme, Point4, Tetric flow. There was significant differences among the materials except Heliomolar flow and Filtek supreme. 2. The sequence of the degree of degradation layer depth was in descending order by Filtek supreme, Heliomolar flow, Tetric flow, Point4. There were significant differences among the materials except Heliomolar flow and Tetric flow. 3. The sequence of Si loss was in descending order by Filtek supreme, Heliomolar flow, Point4, Tetric flow. There were significant differences among the materials except Point 4 and Tetric flow. 4. The sequence of maximum wear depth was in descending order by Heliomolar flow, Point4, Filtek supreme, Tetric flow and there was increasing wear depth on soaking in 0.1N NaOH solution. 5. When observed with SEM, destruction of bonding between matrix and filler was observed and when observed with CLSM, the depth of degradation layer of specimen surface was observed. There results indicate that wear and hydrolytic degradation could be considered to be evaluation factors of composite resins.

이유백서에서 교근절제후 하악과두의 면역조직화학적 연구

최남기,양규호 전남대학교 치과대학 1995 전남치대논문집 Vol.7 No.1

The purpose of this study was to determine whether there was any correlation between temporomandibular joint dysfunction and structure of the mandibular condyle. Weanling rats had their masseter muscles resected and immunohistochemical findings were observed a light microscope. The results obtained were as follows : 1. The condylar cartilage region was divided into articular, proliferating, cartilage cell and hypertrophic cell layers according to cell morphology. 2. In light microscopic views, the proliferating and cartilage cell layers of the experimental group decreased gradually and at the 8the week significantly. 3. In immunohistochemical staining for type Ⅰ and Ⅱ collagen, a reaction was detected in the lower part of proliferating cell and cartilage cell layers. In the acrtilage cell layers, a stronger cellular reaction was present. Immunohistochemical staining for type Ⅱ collagen reacted more strongly than that of type Ⅰ collagen. 4. In immunohistochemical staining for proteoglycan, the staining of the experimental group resembled the control group and gradually showed a weak reaction. The proliferating and cartilage cell layers reacted more strongly than the hypertrophic cell layer. 5. In immunohistochemical staining for proliferating cell nuclear antigen(PCNA), the strong reaction was detected in the nucleus of the proliferating cell layer both in control and experimental groups. But the thickness of the proliferating layer decreased in experimental group, consequently the reaction of the experimental group was reduced more than that of the control group.