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      • KCI등재

        Rh 혈액형의 유전자형 분석기법 연구: 모세관 전기영동을 활용한 법과학적 응용

        조우철(Cho, Woo Cheol),김정용(Kim, Jeong Yong),조윤정(Cho, Yoon Jung),박지환(Park, Ji Hwan),이동섭(Lee, Dong Sub),이진명(Lee, Jin Myung) 경찰대학 경찰학연구편집위원회 2021 경찰학연구 Vol.21 No.4

        지금까지 법과학 분야에서 주로 사용되는 혈액형 분석법은 ABO 혈액형 분석으로 미제 사건 발생 시 불특정 다수의 용의자 중 범위를 좁히고자 할 때 활용된다. 인종에 따라 Rh혈액형의 분포는 큰 차이를 보이는데, 동양인 집단에 속하는 대한민국의 Rh-혈액형 분포가 1% 이내로 상대적으로 희귀하며, 서양의 경우 Rh-혈액형이 상대적으로 빈번하게 나타난다. 이러한 특성은 ABO 혈액형 분석법과 더불어 Rh 혈액형 분석법의 개발이 더욱 필요해질 것으로 보여진다. 이에 비해 법과학 분야에서는 DNA 단위에서의 ABO 혈액형의 유전자형 분석은 가능하지만, Rh 혈액형의 유전자형 분석에 관한 연구가 부족한 실정이다. 따라서 본 연구를 통해 모세관 전기영동을 활용한 Rh 혈액형의 유전자형 분석기법을 마련하고 현장 증거물 적용에 대한 가능성을 파악해보고자 했다. 총 19명의 Rh 혈액형 대상자의 구강내 상피세포 DNA를 추출하여 Rh 혈액형의 핵심 유전자인 RHD의 엑손 5, 7, 10을 확인했다. 10명의 Rh 양성 대상자로부터 추출한 DNA에서 RHD 유전자 엑손 5, 7, 10은 모두 양성으로 확인되었고, 9명의 Rh 음성 대상자로부터 추출한 DNA에서 RHD 유전자 엑손 5, 7, 10은 Rh 음성 7번 시료를 제외하고 모두 음성으로 확인되었다. Rh 혈액형에 대한 혈청학적 판별과 유전자형 분석 결과는 서로 일치했다. 하지만 RHD 변이형으로 추측되는 7번 시료는 혈청학적으로 Rh 음성으로 판별되었지만, 유전자형 분석에서 양성으로 확인되었다. DNA 농도별 구간을 0.0625 ng/μL ~ 0.5 ng/μL로 설정하여 유전자형 분석기법의 민감도를 확인했고, 모든 구간에서 동일한 결과가 나타났다. 본 연구 결과를 통해 혈청학적 판별과 유전자형 분석기법 간의 유의성를 확인했고, 유전자형 분석기법이 현장 증거물에서 추출한 DNA에 적용 가능한 수준의 민감도를 확인했다. RHD 변이형에서 나타난 유전자형 분석기법의 한계점을 파악하여 추후 연구가 필요할 것으로 보여진다. The Rh blood group, along with the ABO blood group, has been actively studied in clinical medicine as it can induce a serious immune response during blood donation. On the other hand, it is possible to analyze the ABO blood group genotype in the forensic science field, but forensic approach on the Rh blood group genotype is very scarce. Therefore, we tried to prepare a genotype method for Rh blood group using capillary electrophoresis and to elucidate the possibility of applying casework evidence sample through this study. Exons 5, 7, and 10 of RHD gene, a key factor for Rh blood group, were identified by extracting buccal swab DNA from 19 Rh blood group subjects. Exon 5, 7, and 10 of RHD gene were confirmed to be positive in Rh-positive group (10 subjects), and exon 5, 7, and 10 of RHD gene were confirmed as negative in Rh-negative group (9 subjects) except for Rh-negative sample no. 7. The results of serological discrimination and genotyping for Rh blood group were consistent with each other. However, Rh-negative sample no. 7, which is speculated to be a RHD variant, was serologically identified as Rh-negative, but was confirmed as positive by genotyping. The sensitivity of the genotyping method was confirmed by serial diluted DNA concentration ranged from 0.0625 ng/μL to 0.5 ng/μL, and peak height of RHD loci was significant in all concentration section. Consequently, the significance between serological discrimination and genotyping was confirmed, and the sensitivity of the genotype method was also confirmed. It seems that further research is required by overcoming the limitations of the genotype method shown in the RHD variant.

      • KCI등재

        부패 시신의 신원확인을 위한 DNA 분석 조직의 비교 및 검증: 발톱 부위별 조직과 늑연골 조직 비교를 중심으로

        정종근(Jung Jong Keun),임상범(Lim Sang Beom),조우철(Cho Woo-Cheol),손현지(Son Hyun Ji),이민호(Lee Min Ho),이진명(Lee Jin Myung),신상철(Shin Sang Cheul) 경찰대학 경찰학연구편집위원회 2021 경찰학연구 Vol.21 No.3

        변사사건에서 변사자의 신원확인은 수사에 중요한 요소이나 부패로 외형적 확인이 불가능한 경우 다양한 방법을 통해 신원확인이 이루어진다. 하지만 다른 조직에 비해 부패가 느리게 진행되는 대퇴골, 골편, 치아와 같은 조직들은 전처리 과정을 거쳐야 하므로 신원확인이 다소 지연된다. 본 연구에서는 2021년 1월에서 6월까지 부검의뢰 된 부패된 시신 12구의 발톱 부위별 조직과 늑연골 조직의 DNA 농도, 분해지수, DNA형 검출 빈도를 비교하였다. DNA 정제에 사용한 조직 무게는 0.05g ~ 0.33g이며, DNA를 추출 후 정량하였을 때 12구 중 11구의 발톱 부위별의 모든 조직에서 DNA가 추출되었다. DNA 분해지수를 비교 시 발톱 부위별 조직과 늑연골 조직의 평균값이 2 이하로 검출되었으며 DNA형 분석에서도 발톱의 조체 조직 11개와 늑연골 조직이 동일한 값으로 검출되었다. 부패된 시신의 부검 후 신원확인에 의뢰되는 조직 중 전처리가 필요한 뼈 조직은 신원확인용 감정물 중 상당 부분을 차지하고 DNA 분석의 전처리 과정에 많은 시간이 소요되는데, 이를 전처리 과정이 필요 없는 발톱의 조체 조직으로 대체 가능성을 확인하였다. 또한 늑연골 조직에 비해 간단히 채취할 수 있는 발톱 조직을 사용한다면 변사 사건 중 부검하지 않는 부패된 시신의 신원확인을 위해 유용하게 사용할 수 있을 것이다. Identification of unknown dead bodies is an essential element for investigation of death cases. In particular, there are a lot of cases with corpses visually(physically) unidentifiable due to decomposition, thus several different kinds of methods are being used for identification of decomposed dead bodies. However, tissues such as femurs, bone fragments, and teeth, which decay more slowly than other tissues, have to undergo a pre-treatment process, which delays the identification. In this study, the DNA concentration, degradation index, and detection frequency of DNA profiles were compared in the toenail tissues (nail-root, nail-bed, and nail-free-edge) and the costal cartilage tissues of 12 decomposed corpses requested for autopsy from January to June 2021. The weight of the tissue used for DNA purification was 0.05 g ~ 0.33 g. After DNA extraction and quantification, DNA was successfully extracted from all the tissues except for one toenail tissue. Most of the DNA degradation index values of toenail tissues and costal cartilage tissues were measured to be 2 or less, and the DNA profiles showed the concordant results between the 11 nail-bed tissues and the 11 costal cartilage tissues. After autopsy of decomposed bodies, a large portion of the tissues requested for identification requires pre-treatment process, which leads to take a lot of time for DNA analysis. Here we have confirmed the possibility of replacing those tissues with nail-bed tissues that does not require a pre-treatment process. Furthermore, if toenail tissues, which can be easily collected compared to costal cartilages, are used, it will be useful for identification of decomposed bodies from death cases that are not autopsied.

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