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      • Molecular structure and maturation of hevein,a chitin-binding protein in rubber tree latex

        이형일 The Graduate School of the Michigan State Univ. 1992 해외박사

        RANK : 153118

        식물에 상처를 내거나 식물 병원체가 침입했을 때 식물체 내에서 식물 보호기 작으로써 새로운 단백질을 많이 생산하게 되는데 이 중에는 chitin에 결합할 수 있는 chitin-binding protein들이 있다. Chitin은 식물 자체에는 존재하지 않으며 대부분의 곰팡이, 곤충에서 발견되고 있다. Chitin-binding protein들 은 많은 종류의 식물에서 발견되고 있으며 공통적인 구조로 대략 43개의 아미 노산으로 구성된 chitin-binding domain을 공통적으로 갖고 있다. Chitin- binding domain (43 amino acid)protein으로 고무나무에서 분리되었기 때문이 다. 이 단백질은 in vitro에서 곰팡이의 성장을 저해하는 효과가 있음이 알려 져 있다. Hevein의 구조와 발현을 연구하기 위해서 hevein cDNA를 cloning하 였다. HEVⅠ의 open reading frame은 세 부분으로 구성되어 있는데 첫 부분은 signal sequence와 유사하고 다음은 hevein domain과 C-terminal domain으로 구성되어 있다. Domain-specific antibody들을 이용하여 첫 부분이 signal sequence로 가능을 하는지 또는 hevein domain과 C-terminal로 구성된 prohev ein이 in vivo에서 processing 되는지 등의 여부를 확인하였다. Hevein cDNA를 발현하는 transgenic tomato plant를 만들어서 post-translati onal processing의 기작, protein targeting 그리고 in vivo에서의 기능을 알아보았다. A family of chitin-binding proteins has been isolated from a wide variety of plant species. A common structural motif of these proteins is the chitin-binding domain that consists of 30 to 43 amino acids and contains a high content of glycine and cysteine residues at conserved positions. A chiiin-binding domain is often referred to as a domain because hevein from the lutoid body (of vacuolar origin) enriched fraction of rubber tree latex possesses only a single chiiin-binding domain of 43 amino acids. Although the exact physiological role of hevein in viva is not understood, it has been shown by in vitro experiments that this protein inhibits the growth of several chitin-containing fungi. To understand structure and expression of hevein, a hevein cDNA clone (HEW) was isolated and characterized. HEW encodes a putative signal sequence of 17 amino acids followed by a polypeptide of 187 amino acids: an amino-terminal domain corresponding to the 43 amino acids of mature hevein linked by a hinge region of 6 amino acids to an extensive carboxyl-terminal domain of 133 amino acids. The difference in polypeptide length between hevein and the HEVi-encoded polypeptide indicates that the formation of mature hevein may result from two proteolytic cleavages of the prohevein in vivo. TO examine this possibility, domain-specific antibodies were generated. Western blot analysis of the biosynthesis of preprohevein both in vitro and in rubber tree latex has revealed that the signal sequence is ootranslationally removed and that the resulting prohevein is cleaved in a subsequent posttranslational processing step. To further understand the posttranslational processing and targeting of hevein, a cDNA construct was introduced into tomato plants. Northern and Western blot analyses showed that the cDNA-encoded proteins were expressed in transgenic tomato plants. Prohevein was posttranslationally processed in transgenic plants. However, only the C-terminal polypeptide was identified as a cleavage product. fntracellular localization of both proteins suggests that they are most likely localized in vacuoles of tomato plants. lt was also found that growth of Tiichoderma hamafum, a chiiin-containing fungus, was retarded in transgenic tomato fruits.

      • An improved 2-dimensional grillage method for analyzing orthogonally stiffened plated grillage structures

        조규남 The Graduate School of the Univ.of Michigan 1985 해외박사

        RANK : 153102

        1. "직교이방성으로 보강된 평판구조물의 해석을 위한 개선된 2차원 격자방법 연구" (An Improved 2-D Grillage Method For Analysing Orthogonally Stiffe ned Plated Grillage Strutures)박사학위논문,조규남,1985. 5,미시간대학교 - 선박구조의 대부분을 차지하고 있는 직교이방성으로 보강된 평판의 효과적 인 설계방법을 제시하기 위하여 정적압축법을 이용한,굽힘과 비틈시의 유효 단면폭을 결정하는 새로운 방법을 등가 강성의 관점에서 유도하여 대표적인 유효폭계산방법을 제시하였으며 이를 이용하여 구조물 해석을 전형적인 선박 구조 모델에 대해서 2차원적으로 수행하여 본 방법의 유용성을 증명하였다. 또한 평판요소와 보강된 보요소와의 요소간 적합성을 가지도록 하는 새로운 모델의 제시로 정확히 구할 수 없는 3차원 모델에 대한 새로운 해석방법이 제 시되었으며 실제예를 통하여 그 유용성을 증명하였다. 2. "직교이방성으로 보강된 평판구조물의 해석을 위한 등가 3차원 방법",조규 남,W. S. Vorus,1987. 6,미국조선학회지(Journal of Ship Research),Vol. 31. ,No . 2. - 직교이방성으로 보강된 평판구조물의 해석을 위한 새로운 3차원 방법 이 제시되었다. 이 방법에서는 시스템의 변위와 하중관계를 수학적으로 관련 지어 평판과 보와의 전단력의 적합성을 검증하기 위한 매트릭스가 개발됐으며 제시된 방법과 다른 기존의 방법과의 비교 검토를 수행하여 이 방법의 우수함 을 증명하였다. 3. "반잠수식 시추선의 실용적 충돌해석",조규남,1987,제3차 선박 및 해양구 조물의 실용적 설계 국제 심포지옴(PRADS'87) - 본 논문에서는 반 잠수식 시추선과 선박과의 충돌시 시추선 부재의 충돌 에 너지 흡수능력을 산정하여 설계에 반영하기 위한 새로운 간략한 방법을 개발 하였으며 이는 충돌시 부재의 변형에 의한 탄성에너지와 소성에너지의 값을 선박의 운동에너지와 등가시킴으로서 얻어지며 이 방법을 이용하여 해석할시 3차원 모델링을 통한 일반해석 프로그램을 사용하지 않고 쉽게 해석을 수행할 수 있다. 3차원 해석방법과 비교함으로서 이 방법의 적용성을 입증하였다.

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