딸기(Fragaria × ananassa) 잎 추출물이 무지개송어(Oncorhynchus mykiss) 두신 유래 대식세포의 항산화 효과에 미치는 영향 = Effects of Strawberry (Fragaria × ananassa) Leaf Extract on Antioxidant in Head Kidney-derived Macrophages of Rainbow Trout (Oncorhynchus mykiss)

국문 초록 (Abstract)

딸기(Fragaria × ananassa) 잎 추출물이 무지개송어(Oncorhynchus mykiss) 두신 유래 대식세포의 항산화 효과에 미치는 영향 이름 이주노 응용생물과학과, 해양생명과학전공 선문대학교 일반대학원 양식 산업에서의 고밀도 사육과 환경 변화는 어류에 스트레스를 유발하 여 과도한 활성산소종 생성을 증가시키고, 이는 산화적 손상과 면역 기능 저하로 이어질 수 있다. 따라서 양식 어류의 건강 관리를 위해 안전하고 경제적인 항산화제 개발이 요구된다. 딸기 수확 후 폐기되는 잎은 폴리페 놀과 플라보노이드가 풍부하여 높은 항산화 잠재력을 지니고 있으나, 수산 분야에서의 활용 연구는 제한적이다. 본 연구에서는 딸기(Fragaria × ananassa) 잎 추출물이 무지개송어(Oncorhynchus mykiss) 두신 유래 대 식세포의 항산화 반응에 미치는 영향을 평가하였다. 딸기 잎 추출물의 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량과 DPPH, ABTS 라디칼 소거능을 분석한 결과, 추출물이 우수한 항산화 활성을 나타내는 것을 확인하였다. 무지개송 어 두신에서 분리한 대식세포에 추출물을 50, 100, 200, 300 µg/mL로 처리 하여 세포 생존율, ROS 및 중성지질 함량, 항산화 효소 활성 및 관련 유전 자 발현을 평가하였다. 세포 생존율은 50–300 µg/mL 범위에서는 대조군과 유의한 차이가 없었으나, 400 µg/mL에서는 유의하게 감소하였다. 총 ROS 는 200–300 µg/mL에서, 미토콘드리아 ROS는 100–200 µg/mL에서 유의하 게 감소하였고, 중성지질 함량 또한 100 µg/mL 이상에서 농도 의존적으로 감소하였다. 항산화 활성 분석 결과, 딸기 잎 추출물은 50–300 µg/mL에서 SOD 효소 활성을, 50–100 µg/mL에서 CAT 효소 활성을 유의하게 증가시 켰으며(P < 0.05), gsr 유전자 발현은 200–300 µg/mL에서 유의하게 증가 하였다(P < 0.05). 전반적인 항산화 반응, 지질 축적 억제 효과 및 세포 독 성을 종합적으로 고려할 때, 200 µg/mL 농도 범위가 무지개송어 대식세포 에서 가장 바람직한 반응을 유도하는 것으로 판단된다. 결론적으로, 딸기 잎 추출물은 무지개송어 두신 유래 대식세포의 산화 스트레스와 중성지질 축적을 완화할 수 있는 천연 기능성 소재로 활용될 수 있는 가능성을 제시 한다. 주제어 : 무지개송어, 딸기 잎 추출물, 항산화, 대식세포, 지질 축적 억제

목차 (Table of Contents)

• 국문요약 ⅰ
• 표 목차 iii
• 그림 목차 iii
• 제1장 서 론 1
• 제2장 재료 및 방법 6
• 1. 딸기 잎 추출물 준비 6
• 2. 딸기 잎 추출물의 성분 분석 9
• 3. 딸기 잎 추출물의 라디칼 소거 활성 11
• 4. 실험어 13
• 5. 두신 유래 대식세포 분리 및 배양 14
• 6. 딸기 잎 추출물 처리 16
• 7. CCK-8을 통한 세포 생존율 평가 17
• 8. 유세포 분석(Flow Cytometry) 18
• 9. 세포 내 단백질 추출 및 정량 21
• 10. 세포 내 항산화능 및 항산화 효소 활성 분석 22
• 11. Total RNA 추출 및 cDNA 합성 25
• 12. Real-time PCR 26
• 13. 통계 분석 28
• 제3장 결과 29
• 1. 딸기 잎 추출물의 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량 29
• 2. 딸기 잎 추출물의 라디칼 소거능 31
• 3. 딸기 잎 추출물에 의한 대식세포 생존율 34
• 4. 딸기 잎 추출물에 의한 대식세포 내 활성산소종 수준 37
• 5. 딸기 잎 추출물에 의한 대식세포 내 중성지질 함량 40
• 6. 딸기 잎 추출물에 의한 대식세포의 항산화 활성 42
• 7. 딸기 잎 추출물에 의한 대식세포의 항산화 관련 유전자 발현44
• 제4장 고찰 47
• 제5장 참고문헌 57
• Abstract 67