포포나무 추출물의 Hippo 신호전달 경로 조절 및 항암 효과에 관한 연구 = A study on regulation of the Hippo pathway and anticancer activity of the Asimina triloba extract

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

This study aimed to investigate whether extracts from Asimina triloba (paw paw ) exhibit anticancer effects in lung cancer cells by modulating the Hippo signaling pathway. Treatment of A 549 cells with Asiminatriloba leaf extracts resulted in a significant, dose-dependent decrease in cell viability as assessed by the CCK -8 assay. Western blot analysis revealed suppressed expression of Y A P and a corresponding increase in phosphorylated Y A P (p-Y A P), suggesting the inhibition of Y A P function and consequent suppression of cell proliferation. In additional experiments using bark extracts, total LATS1/2 protein levels were slightly reduced,where sphosphorylated LATS1/2 (p-LATS1/2) levels showed am arked dose-dependent increase. Notably, treatment with the diethy lether (Et2O) fraction of the M eO H extract led to the most pronounced decrease in Y A P expression, along with the highest levels of p-LA TS1/2 and p-Y A P, indicating strong activation of the Hippo pathway. These findings suggest that Asimina triloba extractand fractions may inhibit Y A P activity through LA TS1/2 phosphorylation, thereby activating the Hippo pathway and effectively suppressing the survival and proliferation of cancer cells. This study highlights Asimina triloba as a potential naturalcom pound candidate with anticancer properties mediated by the Hippo-Y A P signaling axis in lung cancer cells. Further research is warranted to isolate and identify active constituents, validate mechanism sacross various cancer models, and assess in vivo efficacy and toxicity.

국문 초록 (Abstract)

포포나무 추출물에 의한 항암 효과 본 연구는 포포나무(Asimina triloba) 추출물이 폐암 세포주에서 Hippo 신호 전달 경로를 조절하여 항암 활성을 나타내는지를 확인하고자 하였다. A549 세포에 포포나무 잎 MeOH 추출물을 처리한 결과, CCK-8 분석에서 농도의 증가함에 따라 세포 생존율 유의미한 감소가 관찰되었으며, Western blot 분석 에서는 YAP 단백질의 발현이 억제되고 p-YAP의 발현이 증가하는 경향을 나 타냈다. 이는 YAP 기능의 억제를 통해 세포 증식을 억제하는 효과로 해석된 다. 또한, 포포나무 껍질 MeOH 추출물 및 MC, Et2O분획물을 이용한 추가 실 험에서, LATS1/2 단백질의 총 발현량은 다소 감소한 반면, p-LATS1/2의 발현 은 처리 농도에 비례하여 뚜렷하게 증가하였다. 특히 Et2O 분획물 처리 시 YAP의 발현이 가장 크게 억제되었고, p-LATS1/2, p-YAP의 발현이 가장 뚜렷 하게 증가하여 강한 Hippo 경로 활성화를 유도한 것으로 판단된다. 이러한 결 과는 포포나무 추출물이 LATS1/2의 인산화를 통해 YAP 활성을 억제하고, Hippo 경로를 활성화함으로써 암세포의 생존 및 증식을 효과적으로 저해할 수 있음을 시사한다. 본 연구는 포포나무 추출물이 폐암 세포에서 Hippo-YAP 신호전달 경로를 매개로 항암 활성을 나타낼 수 있는 천연물 기반 후보 물질 임을 제시하며, 향후 유효 성분 정제, 다양한 암 세포주 모델을 통한 기전 검 증, 생체 내 효능 및 독성 확인 등 후속 연구가 필요한 것으로 판단된다. 주제어 천연물, Asimina triloba, YAP, LATS1/2, Hippo 신호전달경로

목차 (Table of Contents)

• Ⅰ. 서 론 1
• 1. 연구 배경 1
• 1.1. 폐암의 발생과 치료 1
• 1.2. 포포나무에 대한 연구 2
• 1.3. Hippo 신호전달 경로 3
• 2. 연구 목적 7
• Ⅱ. 본 론 8
• 1. 재료 및 방법 8
• 1.1. 시료 준비 및 추출물 분획 8
• 1.2. 실험 재료 8
• 1.3. 항체 9
• 1.4. 실험 방법 9
• 1.4.1. HPLC 분석 9
• 1.4.2. 세포배양 10
• 1.4.3. 세포분열 분석 11
• 1.4.4. western blot 분석 11
• 1.4.5. 통계 분석 12
• 2. 결과 및 고찰 13
• 2.1. 세포분열에 대한 포포나무 추출물의 영향 13
• 2.1.1. 포포나무 잎 추출물의 암세포 선택적 세포 독성 효과 13
• 2.1.2. 포포나무 추출물 농도에 따른 세포분열 변화 17
• 2.1.3. 포포나무 추출물 분획 및 HPLC 분석 23
• 2.2. 포포나무 추출물의 농도에 따른 Hippo 신호전달 경로 관련 단백질 변화 분석 27
• 2.2.1. 포포나무 잎 추출물과 분획물 농도에 따른 Y A P의 활성 변화 27
• 2.2.2. 포포나무 껍질 추출물과 분획물 농도에 따른 LATS1/2와 YAP의 활성 변화 30
• Ⅲ. 결 론 33
• 참 고 문 헌 35
• ABSTRACT 39