혈청을 이용한 마우스 미성숙 난자의 성숙에 관한 연구 = Study on the Maturation of Mouse Immature Oocytes Using Serum

국문 초록 (Abstract)

최근 난임 인구의 증가는 보조생식술의 중요성을 더욱 부각하고 있다. 기존 체외 수정 시술은 고농도의 성선 자극 호르몬 사용으로 난소과자극증후군 등 부작용을 유발할 수 있어, 항암 치료 환자나 고위험군에서는 안전한 난자 확보를 위한 체외 성숙 기술의 필요성이 증가하고 있다. 체외 성숙은 미성숙 난자를 체외에서 성숙시 키는 기술로 호르몬 사용을 줄일 수 있으나, 체내 성숙 난자에 비해 성숙률과 배아 발달 능력이 낮다는 한계가 있다. 본 연구에서는 태아 소 혈청(FBS) 또는 인간 제대 혈 혈청(hUCS)을 체외 성숙 배지에 첨가하고 기존 인간 혈청 알부민(HSA) 조건과 비교하여 혈청이 난자 성숙과 초기 배아 발달에 미치는 영향을 평가하였다. 혈청 첨가군의 성숙률(FBS 약 72%, hUCS 약 82%)은 HSA 조건(약 48%)보다 높았으나, 수정 후 배반포 발달률은 체내 성숙 난자보다 현저히 낮았고 많은 배아가 2세포 단 계에서 발달이 정지되었다. 이는 외형적으로는 성숙하더라도 기능적 성숙은 충분하 지 않음을 시사한다. 세포소기관 분석에서 체외 성숙 난자는 미토콘드리아 분포와 활성 면에서 체내 성숙 난자와 유사했으나, 이러한 지표만으로 낮은 발달 능력을 설명하기는 어려웠다. 특히 FBS 조건에서 약 9%의 성숙란이 수정 없이 전핵을 형 성해 핵 성숙의 이상 가능성이 확인되었다. 종합하면, 혈청 첨가는 난자의 형태적 성숙률은 향상시키지만 초기 배아 발달 능력에는 한계가 있으며, 이는 배지 구성뿐 아니라 난자의 내재적 품질과 배양 환경 등 다양한 요인의 영향을 받을 수 있음을 보여준다. 향후 체외 성숙 난자의 기능적 완성도를 높이기 위한 연구가 필요하다.

목차 (Table of Contents)

• I. 서론 1
• Ⅱ. 실험재료 및 방법 3
• 1. Mouse experiment 3
• 2. 시약 3
• 3. 체내 성숙 배지 준비 4
• 4. 체외 성숙 배지 준비 4
• 5. 체외 수정 및 체외 배아 배양 배지 준비 4
• 6. 과배란 유도 5
• 7. 체내 성숙 난자 채취 (In Vivo Maturation, IVO) 5
• 8. 체외 성숙 난자 채취 (In Vitro Maturation, IVM) 5
• 9. 정자 채취 및 수정능(Capacitation) 획득 6
• 10. 체외 수정 (In Vitro Fertilization, IVF) 6
• 11. 현미경 관찰 7
• 12. 통계처리 7
• Ⅲ. 결과 8
• 1. FBS supplementation improves oocyte morphology and increases maturation efficiency during In Vitro Maturation 8
• 2. hUCS Supplementation improves meiotic progression and enhances oocyte maturation efficiency 10
• 3. Serum supplementation alters meiotic stage distribution and reduces MI arrest during IVM 12
• 4. Reduced Blastocyst Formation Competence of IVM-Derived Oocytes After IVF 14
• 5. IVM-derived oocytes exhibit severe defects in early embryonic development after IVF 16
• 6. MitoTracker analysis reveals comparable mitochondrial signal intensity between IVO and IVM oocytes 18
• 7. TMRM staining reveals comparable mitochondrial membrane potential among IVO and IVM oocytes 20
• 8. Abnormal spontaneous pronuclear formation occurs exclusively in IVM(FBS) oocytes 22
• Ⅳ. 고찰 24
• Ⅴ. 참고문헌 26
• 영문요약 29