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      하수 유래 항생제 내성 대장균 노출 시 제브라피시의 항생제 내성, 유전자 획득, 장내 미생물 군집 변화에 대한 연구

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      https://www.riss.kr/link?id=T17377196

      • 저자
      • 발행사항

        서울 : 한국외국어대학교 대학원, 2026

      • 학위논문사항

        학위논문(석사) -- 한국외국어대학교 대학원 , 환경공학과 , 2026. 2

      • 발행연도

        2026

      • 작성언어

        한국어

      • 주제어
      • DDC

        628 판사항(22)

      • 발행국(도시)

        서울

      • 기타서명

        Study on antibiotic resistance, gene acquisition, and gut microbiota community changes in Zebrafish (Danio rerio) exposed to wastewater-borne antibiotic-resistant Escherichia coli

      • 형태사항

        59 p. : 삽도 ; 26 cm

      • 일반주기명

        한국외국어대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
        지도교수: 정태용
        참고문헌: p. 53-59

      • UCI식별코드

        I804:11059-200000963598

      • 소장기관
        • 한국외국어대학교 글로벌캠퍼스 도서관 소장기관정보
        • 한국외국어대학교 서울캠퍼스 도서관 소장기관정보
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      국문 초록 (Abstract) kakao i 다국어 번역

      항생제 내성(Antimicrobial Resistance, AMR)은 전 세계적인 공중보건 위협이며, 도시 하수처리장은 항생제 내성균과 내성 유전자를 수생 환경으로 방출하는 핵심 오염원으로 지목되고 있다. 그러나 하수에서 유래한 항생제 내성균이 어류와 같은 수생 척추동물의 체내로 유입되었을 때 발생하는 생체 내 상호작용, 특히 내성 유전자의 수평적 이동과 장내 미생물 군집의 변화에 대한 연구는 부족한 실정이다. 이에 본 연구는 하수 유래 항생제 내성 대장균(Escherichia coli)에 노출된 제브라피시(Danio rerio)의 장내 미생물 군집 변화, 내성 유전자 획득 여부 및 노출 농도에 따른 영향을 종합적으로 규명하고자 하였다. 본 연구에서는 CTX-M-9 group 내성 유전자를 보유한 하수 유래 E. coli L2-34 균주를 제브라피시에게 15일간 경구 투여하였으며, 연구 그룹은 대조군, 비 내성균 노출군, 그리고 내성균 농도별(저농도, 중농도, 고농도) 노출군으로 구성하였다. 노출 후 채취한 샘플에서 Cefotaxime 선택배지를 이용한 균 분리, 최소저해농도(MIC) 시험, 그리고 PCR 기법을 통해 내성 유전자 전달 여부를 분석하였고, 장내 미생물 군집 변화는 16S rRNA 유전자 염기서열 분석을 통해 확인하였다. 연구 결과, 1.5 x 108, 1.5 x 107 CFU/mL 의 고농도 및 중농도 내성균 노출군에서는 CTX-M-9 내성 유전자의 내성 표현형 획득이 확인되었다. 저농도(1.5 x 106 CFU/mL) 노출군에서는 내성균의 정착이 억제되었다. 또한, 고농도 노출은 장내 미생물 다양성을 감소시키고 Aeromonas 및 Shewanella와 같은 잠재적 기회감염균의 비중을 증가시켰다. 반면, 비 내성균 노출군에서는 Cetobacterium의 과도한 증식을 보이며 군집 불안정성을 나타냈다. 결론적으로 외부 유입 세균이 장내 생태계에 미치는 영향은 균주의 내성 여부와 유입 농도에 따라 상이하게 나타났다. 내성균 노출군에서는 고농도(1.5 x 108 CFU/mL)와 중농도(1.5 x 107 CFU/mL)에서 CTX-M-9 group 내성 유전자를 획득하였으나, 저농도(1.5 x 106 CFU/mL)에서는 획득하지 못하였다. 그리고 고농도의 내성균 유입은 장내 방어 기전을 붕괴시키고 병원성 위험을 증가시키는 반면, 비 내성균 노출은 생태학적 불안정성을 유발할 수 있음을 확인하였다. 이러한 결과는 수 생태계 유래 항생제 내성균의 위해성 평가 시 단순한 검출 여부를 넘어 농도를 고려한 접근과 숙주 미생물 군집의 생태학적 관점이 고려되어야 함을 시사한다.
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      항생제 내성(Antimicrobial Resistance, AMR)은 전 세계적인 공중보건 위협이며, 도시 하수처리장은 항생제 내성균과 내성 유전자를 수생 환경으로 방출하는 핵심 오염원으로 지목되고 있다. 그러나 ...

      항생제 내성(Antimicrobial Resistance, AMR)은 전 세계적인 공중보건 위협이며, 도시 하수처리장은 항생제 내성균과 내성 유전자를 수생 환경으로 방출하는 핵심 오염원으로 지목되고 있다. 그러나 하수에서 유래한 항생제 내성균이 어류와 같은 수생 척추동물의 체내로 유입되었을 때 발생하는 생체 내 상호작용, 특히 내성 유전자의 수평적 이동과 장내 미생물 군집의 변화에 대한 연구는 부족한 실정이다. 이에 본 연구는 하수 유래 항생제 내성 대장균(Escherichia coli)에 노출된 제브라피시(Danio rerio)의 장내 미생물 군집 변화, 내성 유전자 획득 여부 및 노출 농도에 따른 영향을 종합적으로 규명하고자 하였다. 본 연구에서는 CTX-M-9 group 내성 유전자를 보유한 하수 유래 E. coli L2-34 균주를 제브라피시에게 15일간 경구 투여하였으며, 연구 그룹은 대조군, 비 내성균 노출군, 그리고 내성균 농도별(저농도, 중농도, 고농도) 노출군으로 구성하였다. 노출 후 채취한 샘플에서 Cefotaxime 선택배지를 이용한 균 분리, 최소저해농도(MIC) 시험, 그리고 PCR 기법을 통해 내성 유전자 전달 여부를 분석하였고, 장내 미생물 군집 변화는 16S rRNA 유전자 염기서열 분석을 통해 확인하였다. 연구 결과, 1.5 x 108, 1.5 x 107 CFU/mL 의 고농도 및 중농도 내성균 노출군에서는 CTX-M-9 내성 유전자의 내성 표현형 획득이 확인되었다. 저농도(1.5 x 106 CFU/mL) 노출군에서는 내성균의 정착이 억제되었다. 또한, 고농도 노출은 장내 미생물 다양성을 감소시키고 Aeromonas 및 Shewanella와 같은 잠재적 기회감염균의 비중을 증가시켰다. 반면, 비 내성균 노출군에서는 Cetobacterium의 과도한 증식을 보이며 군집 불안정성을 나타냈다. 결론적으로 외부 유입 세균이 장내 생태계에 미치는 영향은 균주의 내성 여부와 유입 농도에 따라 상이하게 나타났다. 내성균 노출군에서는 고농도(1.5 x 108 CFU/mL)와 중농도(1.5 x 107 CFU/mL)에서 CTX-M-9 group 내성 유전자를 획득하였으나, 저농도(1.5 x 106 CFU/mL)에서는 획득하지 못하였다. 그리고 고농도의 내성균 유입은 장내 방어 기전을 붕괴시키고 병원성 위험을 증가시키는 반면, 비 내성균 노출은 생태학적 불안정성을 유발할 수 있음을 확인하였다. 이러한 결과는 수 생태계 유래 항생제 내성균의 위해성 평가 시 단순한 검출 여부를 넘어 농도를 고려한 접근과 숙주 미생물 군집의 생태학적 관점이 고려되어야 함을 시사한다.

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      목차 (Table of Contents)

      • I. ABSTRACT 5
      • II. INTRODUCTION 7
      • III. MATERIALS & METHODS 11
      • I. ABSTRACT 5
      • II. INTRODUCTION 7
      • III. MATERIALS & METHODS 11
      • A. 실험동물 및 사육 조건 11
      • B. 사용 균주 및 배양 조건 12
      • C. 균 현탁액 제조 12
      • D. 실험 설계 14
      • E. 시료 채취 및 처리 15
      • F. 장내 미생물 분리 및 항생제 내성 평가 16
      • G. 16S rRNA 유전자 염기서열 분석을 통한 장내 미생물 군집 분석 18
      • H. 통계 분석 21
      • IV. RESULT 22
      • A. 항생제 내성 획득 및 수평적 유전자 이동 가능성 . 22
      • B. 16S rRNA 유전자 염기서열 분석의 품질 검증 28
      • C. E.coli 급여에 따른 장내 미생물 군집 다양성 변화 . 30
      • D. 장내 미생물 군집 조성 변화 32
      • V. DISCUSSION 38
      • A. 항생제 내성균의 노출 농도가 내성 유전자 전파 및 정착에 미치는 영향 38
      • B. 항생제 내성 유전자와 항생제 내성 발현 여부의 관계 40
      • C. 항생제 내성균이 장내 미생물 군집 다양성에 미친 영향. 42
      • D. 비 내성균 노출군에서 나타난 Cetobacterium 의 과도한 우점과 군집 단순화. 43
      • E. 내성 유전자 보유 여부에 따라 장내 생태계에 미치는 차이 45
      • F. 비 내성균 노출에 따른 특정 미생물군의 변화. 45
      • G. 연구의 한계. 48
      • VI. CONCLUSION 49
      • VII. ACKNOWLEDGEMENT. 51
      • VIII. REFERENCE 53
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