고지혈증 치료를 위한 HMG-CoA 환원효소 억제제와 NPC1L1 억제제의 RP-HPLC를 이용한 동시 정량분석법 연구 = A Study on the Simultaneous Quantitative RP-HPLC Method for HMG-CoA Reductase Inhibitors and NPC1L1 Inhibitors Used in the Treatment of Hyperlipidemia

국문 초록 (Abstract)

스타틴 계열의 약물은 전 세계적으로 가장 광범위하게 사용되는 지질 강하제이지만 용량을 단독으로 증가시키는 것은 저밀도 콜레스테롤 수치를 권장 수준까지 달성시키기 힘들어 콜레스테롤 흡수 억제제로 알려진 에제티미브와의 병용 요법이 권장된다. 이에 따라 제약 산업 전반에서도 고지혈증 복합제제에 대한 개발이 확장되는 추세이며, 복합제제의 성분을 효율적으로 관리하고 규제 기준을 충족하기 위한 신뢰성 있는 분석 방법의 확립이 필요하다.
본 연구에서는 고지혈증 치료제로 사용되는 3가지 성분인 피타바스타틴, 로수바스타틴, 에제티미브의 동시 정량 분석을 하기 위하여 최대 흡수 파장인 254 nm에서 완충액의 pH, 이동상의 조성, 적합한 컬럼을 평가하였으며, 최적의 조건을 선정해 등용매 기법으로 분석을 진행하였다. 검출기는 UV Detector(245 nm)에서 분석했으며, pH 5.0 완충액과 아세토니트릴을 (50:50)의 비율로 혼합한 혼합액을 이동상으로 유속 1.0 mL/min에서 20 μL씩 주입하여 분석하였다. 특이성, 시스템적합성, 직선성, 정확성, 정밀성을 산출하였으며, 모두 결과값을 만족해 본 분석 방법은 3가지의 주성분을 동시에 분리 및 정량할 수 있도록 확립되었다고 사료된다.

목차 (Table of Contents)

• 제 1 장 서론 1
• 1.1. 개요 1
• 1.1.1. 고지혈증의 동향과 정의 1
• 1.1.2. 고지혈증 치료제 2
• 1.1.2.1. HMG-CoA 환원효소 억제제 2
• 1.1.2.1.1. 피타바스타틴 3
• 1.1.2.1.2. 로수바스타틴 3
• 1.1.2.2. NPC1L1 억제제 4
• 1.1.2.3. 피브레이트계 4
• 1.1.2.4. PCSK9 억제제 5
• 1.1.2.5. 오메가-3 지방산 5
• 1.2. 복합제제 6
• 1.2.1. 복합제제의 필요성 6
• 1.2.2. 단독 투여와 병용 투여 6
• 1.3. 본 연구의 주안점 및 목적 7
• 1.3.1. 주안점 7
• 1.3.2. 한계점 및 동시 분석법 개발의 필요성 7
• 1.3.3. 목적 8
• 제 2 장 실험 재료 및 방법 9
• 2.1. 시약 및 재료 9
• 2.2. 표준액 및 검액 조제 9
• 2.2.1. 표준액 조제 9
• 2.2.2. 검액 조제 9
• 2.3. HPLC 시스템 및 분석 10
• 2.4. 시험법 밸리데이션 10
• 2.4.1. 특이성 10
• 2.4.2. 시스템적합성 10
• 2.4.3. 직선성 11
• 2.4.3.1 직선성 표준액 조제 11
• 2.4.4. 정확성 11
• 2.4.5. 정밀성 12
• 2.4.6. 용액의 안정성 확인 12
• 제 3 장 결과 및 고찰 13
• 3.1. 최적의 분석 파장 선택 13
• 3.2. 분리 및 정량 가능한 이동상의 선택 13
• 3.2.1. 완충액 pH에 따른 평가 13
• 3.2.2. 이동상 조성에 따른 평가 14
• 3.3. 컬럼에 따른 영향 평가 15
• 3.4. 고찰 16
• 3.4.1. 공정서 내 시험법과의 분석적 특성 비교 16
• 3.4.2. 분석 기기 측면에서의 비교 17
• 3.4.3. 선행 연구와의 효율성 비교 18
• 3.4.3.1. 이동상 용리 조건 측면 18
• 3.4.3.2. 분석 시간 측면 19
• 3.5. 시험법 검증 20
• 3.5.1. 특이성 20
• 3.5.2. 시스템적합성 20
• 3.5.3. 직선성 20
• 3.5.4. 정확성 21
• 3.5.5. 정밀성 21
• 3.5.6. 용액의 안정성 확인 21
• 제 4 장 결론 22
• 제 5 장 본 연구의 응용과 향후 계획 24
• 제 6 장 참고문헌 25
• Table 1. Analysis parameters of HPLC 36
• Table 2. Concentration of linear standard solution 37
• Table 3. Characteristics organized by column change 38
• Table 4. System suitability results 39
• Table 5. Linearity results 41
• Table 6. Accuracy results 42
• Table 7. Precision results 45
• Table 8. Reanalyzed robustness results after 24 hours 46
• Figure 1. Structure of each component 48
• Figure 2. UV spectrum analysis of each standard solution for selection of maximum absorption wavelength (1) 49
• Figure 3. UV spectrum analysis of each standard solution for selection of maximum absorption wavelength (2) 50
• Figure 4. Evaluation results by buffer pH 51
• Figure 5. Results according to mobile phase composition (1) 52
• Figure 6. Results according to mobile phase composition (2) 53
• Figure 7. Individual standard solutions to check specificity 54
• Figure 8. Mixed standard solution to check the degree of separation 55