Topical application of Scutellaria Baicalensis extract for the treatment of allergic skin reaction

국문 초록 (Abstract)

본 실험은 황금의 국소처리에 의한 Allergy성 접촉피부염의 면역과민반응 및 염증반응에 미치는 영향을 조사 하기 위해서 다양한 Allergy model을 이용하여 알러지성 접촉성 피부염에 대한 치료효과를 평가하였다. 또한 국소처리제의 개발을 위한 안전성에 관한 기초자료를 축적하기 위해 피부자극성 및 피부감작성 등의 국소독성시험을 수행하였다.
황금은 anti-DNP IgE에 의해 수동적으로 유도된 전신 및 피부 아나필락시 반응을 억제하였으며, 시험관내 실험에서 anti-DNP IgE에 의해 유도된 비만세포(RBL-2H3세포주)의 탈과립을 억제하였다. BALB/C계 생쥐를 DNCB 처리군과 DNCB 처리 후 황금추출액을 국소적으로 피부에 도포한 황금추출물투여군으로 나누어 2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB)를 도포하여 Allergy성 접촉피부염을 유발한 뒤, 시간의 경과에 따라 contact hypersensitivity assay, 피부의 일반적인 구조, 림프구를 비롯한 염증세포, 비만세포, IgE, TNF-alpha, IFN-gamma, IL-4 의 감소를 나타내었다. 또한 피부조직내 항산화 활성을 측정하기 위해 GSH, NO, TBARS, SOD의 변화를 관찰한 결과, 항산화 활성을 증가시켰다. 또한 토끼를 이용한 피부자극시험 및 햄스터를 이용한 피부감작성 시험에서 어떠한 피부자극성은 물론 피부감작성도 관찰되지 않았다.
상기의 결과를 바탕으로 황금추출물 피부적용은 알러지성 접촉성 피부염을 완화시키며, 피부자극성 및 피부감작성이 없는 안전한 물질로 확인되었다. 그러나, 황금추출물을 이용한 피부적용제의 개발을 위한 제형 연구와 비임상 안전성 평가 및 임상시험 등의 치료제 개발을 위한 추가연구가 필요할 것으로 판단된다.

목차 (Table of Contents)

• Contents
• Ⅰ. Introduction 1
• 1. Allergic reaction 1
• 2. Immune system of skin 5
• 3. Allergic contact dermatitis 8
• 4. Medicinal plants 15
• 5. Scutellaria baicalensis 16
• Ⅱ.Materials and Methods 26
• 1. Preparation of standardized Scutellarea bacalensisaqueous extrac 26
• 2. In vitro efficacy test 28
• 2.1. Inhibitory effect of WSBE in Beta-hexosaminidase release 28
• 3. In vivo efficacy test 29
• 3.1. Preventive effect of WSBE on DNCB induced allergic contact dermatitis 29
• 3.1.1. Animals 29
• 3.1.2. DNCB induced allergic contact dermatitis 29
• 3.1.3. Skin lipid peroxidation, nitric oxide, superoxide dismutase and glutathione content 30
• 3.1.4. Cytokine production in skin 31
• 3.1.5. Serum IgE and IgG ;antibody measurement 31
• 3.1.6. Histopathological examination 31
• 3.2. Preventive effect of WSBE on IgE-dependent cutaneous reaction 32
• 3.2.1. Animals 32
• 3.2.2. IgE-dependent cutaneous reaction 32
• 3.2.3. Assessment of ear thickness 33
• 3.2.4. Histopathological examination 33
• 4. Pharmacokinetics 34
• 4.1. Animals 34
• 4.2. Application and blood sampling 34
• 4.3. Assessment of blood concentration of WSBE 35
• 5. Safety test 35
• 5.1. Dermal irritation and corrosion tets for WSBE in rabbits 35
• 5.1.1. Animals 35
• 5.1.2. Irritation and corrosion test 36
• 5.2. Skin sensitization test for WSBE in guinea pig 37
• 5.2.1. Animals 37
• 5.2.2. Skin sensitization test 37
• 6. Statistical analysis 38
• Ⅲ.Results 39
• 1. Fingerprint analysis of Scutellarea bacalensisaqueous extract 39
• 2. Inhibitory effect of WSBE on Beta-hexosaminidase release 41
• 3. Anti-inflammatory effect of WSBE in cutaneous reaction 43
• 4. Preventive effect of WSBE on DNCB induced contact dermatitis 48
• 5. Effect of WSBE on oxidative stress in DNCB induced contact dermatitis 53
• 6. Cytokine and immunoglobulin production in DNCB induced contact dermatitis 55
• 7. Pharmacokinetics of WSBE in SD rats 58
• 8. Irritation and corrosion of WSBE 61
• 9. Skin sensitization 64
• Ⅳ.Discussions 66
• Ⅴ.Conclusions 72
• Ⅵ.References 73